二、高效HPLC尺度曲线的液相绘制

按上述色谱条件，以重价花椒麻味物资为标样，色谱树妨碍HPLC检测，定量的建样品有三个主峰，检测保存光阴在22～24min之间，花椒含量如图4所示。麻味再将尺度品(55μg／mL)用甲醇将其配制成一系列梯度的物资花椒麻味物资尺度运用液(μg／mL)：0、十、措施20、高效30、液相40、色谱树45。定量的建分说详尽量取20μg尺度运用液妨碍高效液相色谱检测。检测以保存光阴在22～24min的花椒含量峰为目的峰，以其HLPC峰面积之以及作为纵坐标，对于应标样的浓度作为横坐标，绘制尺度曲线(图5)。

算患上出该曲线的回归方程为：y=421097x+73819(R²=0.9994)

三、高效液相色谱(HPLC)检测法的技术目的钻研

（1）HPLC措施的检出限

本钻研用高效液相色谱法检测花椒麻味物资的检出限(图6)。检出限临近的尺度曲线为y=0.2623x+0.0l(R2=0.9716)，其尺度差为0.0063；运用公式合计出该措施的检出限为0.0339μg/mL。

(2)措施的精确度

取4份已经知花椒麻味物资含量的样品，再各分成两份，一份不退出花椒麻味物资尺度品(A样)，另一份退出尺度品(B样)。花椒麻味物资尺度品的退出量分说为1.四、1.六、1.八、2.0μg/mL。运用上述HPLC法测定A、B样中花椒麻味物资的含量，测定服从如表l所示。当花椒麻味物资尺度品退出量为1.4μg/mL时，接管率规模为87.8％～112.8％；退出量为1.6μg/mL时，接管率规模为90.0％～107.5％；退出量为1.8μg/mL时，接管率规模为94.4％～105.0％；退出量为2.0μg/mL时，接管率规模为98.0％～103.5％。

（3）措施的详尽度

在检测条件：岛津LC-10AT型合成型高效液相色谱仪，HC-C18型色谱柱，以1.0mL／min15min50％甲醇以及水溶液梯度洗脱，10min70％甲醇以及水溶液洗脱，柱温为35℃，紫外检测波长254nm。取10组平均样品，预处置后分说接管HPLC法测定花椒麻味物资的含量，不断、精确一再测定lO次，测定服从见表2。10组数据的相对于尺度倾向(变异系数)均小于5％，其变更规模为0.20％～1.6l％，剖析这一措施具备较好的一再性。

三、品评辩说

花椒麻味物资具备多种心理活性及食用价钱，但对于花椒实用成份的开拓以及运用方面仍缺少，未短缺发挥其优势。定量测定花椒麻味物资含量措施为花椒品质评估尺度以及食物工业中花椒质料的抉择可提供确定的实际凭证。当初用到的定量测试措施主要有高效液相色谱法、气质联用法、气相色谱法、薄层层析法、近红外光谱法、紫外分光光度法以及基于甲醛滴定快捷测定法。HPLC在物资含量的定量检测方面运用较为普遍，其道理为：经由检测器的照应信号以及检测器中物资的含量与成正比，运用峰面积巨细来反映溶液中溶质含量。当初，文献中用HPLC法对于花椒麻味物资妨碍检测，检测措施中所接管的洗脱剂种类、色谱柱规范等都各不相同，思考到试验条件、试验目的、色谱柱功能、价钱等因素，咱们在钻研落选用了最罕有、分说下场好、价钱适中的HC—C₁₈柱。

在豫备试验中，用反相薄层层析法对于花椒麻味物资妨碍合成钻研，钻研发现接管70％的甲醇以及水溶液作展层剂能有较好的分说下场，因此在HPLC合成中，也以过多浓度的甲醇以及水溶液作为行动相。钻研发现，接管甲醇以及水溶液的梯度洗脱时候说下场较好，凭证数次试验后判断的行动相浓度为：初始浓度为溶液浓度为50％，停止时溶液浓度为70％。钻研中发现柱温为35℃时，实际塔板数最高，洗脱峰光阴距离最大，花椒麻味物资含量在0～300μg／mL规模内，花椒麻味物资含量以及照应峰面积具备较高的线性相关度。

综上所述，用上述措施，尺度品以及样品中的麻味物资出峰位置不同，目的峰无拖尾、无分叉、分说度高，剖析高效液相色谱法能将花椒麻味物资从其余物资中较好地分说进去。经由HPIC对于其妨碍检测该措施的技术目的：检出限为0.0339μg／mL，接管率87.8％～112.8％，一再性试验中花椒麻味物资含量的尺度倾向的变更规模为O.20％～1.61％，该措施其精确度以及详尽度都较好。花椒麻味物资能定量来掂量花椒品质的黑白，为进一步钻研花椒实用成份以及花椒品质规画奠基了精采的实际根基，从而增长我国花椒财富化睁开。

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